產(chǎn)品簡介：
本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿中的 LXA4 含量。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于炎癥消退、免疫調(diào)控、脂代謝及過敏性疾病研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱：大鼠脂氧素A4(LXA4)elisa試劑盒
英文名稱：LXA4 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
產(chǎn)品貨號：CS-5218E
檢測原理：
大鼠脂氧素 A4 (LXA4) elisa 試劑盒的原理是?競爭法?，通過固相載體包被抗原，樣本中抗原與固相抗原競爭結(jié)合特異性抗體，最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。
?固相化?：微孔板預(yù)先包被 LXA4 人工抗原。
?結(jié)合?：加入標準品或樣本與特異性抗體混合液，LXA4 與固相抗原競爭結(jié)合抗體。
?檢測?：加入 HRP 標記的二抗，與結(jié)合在固相載體上的抗體形成復(fù)合物。
?顯色?：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍色變?yōu)辄S色。
?測定?：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成反比。
實驗步驟?：
?試劑準備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?：每孔加入100μL標準品或樣本，37℃孵育90分鐘。
?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復(fù)5次。
?加檢測抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。
?洗滌?：同步驟3。
?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。
?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍變黃）。
?檢測?：450nm波長測定吸光度(OD值)，15分鐘內(nèi)完成。
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操作步驟?：
1.試劑平衡試劑盒室溫平衡 30 min；濃縮洗滌液按說明書稀釋混勻。
2.設(shè)孔加樣設(shè)空白、標準品、待測樣品孔，精準加樣，封板。
3.溫育結(jié)合37℃孵育 30–60 min，棄液拍干。
4.洗板加滿洗滌液浸泡，甩干拍干，重復(fù)3–5 次。
5.加酶結(jié)合物除空白孔外每孔加 HRP 標記液，封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗凈未結(jié)合游離酶，控干殘留液體。
7.顯色避光加顯色液 A/B，避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數(shù)加終止液變色穩(wěn)定后，立刻酶標儀讀 OD 值。
9.結(jié)果計算標準曲線擬合，換算樣本濃度。
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