產(chǎn)品簡介：
本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿中的血管緊張素Ⅱ（ANG-Ⅱ）含量。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL，靈敏度達0.16 ng/mL，適用于血壓調(diào)節(jié)、腎素-血管緊張素系統(tǒng)激活、心血管疾病及腎臟功能相關(guān)研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱：大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa試劑盒
英文名稱：ANG-Ⅱ ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
產(chǎn)品貨號：CS-5368E
檢測原理：
大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ) elisa試劑盒的原理是競爭法，通過固相載體包被抗原與樣本抗原競爭結(jié)合抗體，再用酶標記二抗進行識別，最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。
固相化：微孔板預(yù)先包被大鼠ANG-Ⅱ人工抗原。
結(jié)合：加入標準品或樣本與特異性抗體混合液，樣本ANG-Ⅱ與固相抗原競爭結(jié)合抗體。
檢測：加入HRP標記的二抗，與結(jié)合在固相載體上的抗體形成復(fù)合物。
顯色：加入TMB底物，被HRP催化后由藍色變?yōu)辄S色。
測定：用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值)，濃度與OD值成反比。
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操作步驟?：
?1. 試劑準備
將試劑盒所有組分平衡至室溫（20–25℃，≥30min）；濃縮洗滌液按 1:19 稀釋配制工作液。
標準品用標準品稀釋液復(fù)溶，梯度稀釋，配置系列濃度梯度標準溶液，備用。
2. 實驗流程
加樣：設(shè)置空白孔、標準孔、樣本孔，每孔加入 100 μL 對應(yīng)標準品 / 待測樣本，封板，37℃恒溫孵育 90 min。
洗滌：棄凈孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌工作液，靜置 30 s，甩干拍凈，重復(fù)洗滌 5 次。
加酶結(jié)合物：每孔加入 100 μL HRP 標記檢測抗體，封板混勻，37℃孵育 60 min。
洗滌：重復(fù)上述洗滌步驟 5 次，拍干微孔。
顯色：每孔避光加入 90 μL TMB 底物顯色液，輕柔混勻，37℃避光顯色 15 min。
終止：按同等順序每孔快速加入 50 μL 終止液，輕晃混勻，溶液由藍轉(zhuǎn)黃。
讀數(shù)：15 min 內(nèi)，酶標儀 450 nm 波長測定各孔 OD 值，擬合標準曲線計算樣本含量。
3. 關(guān)鍵質(zhì)控要點
全程孵育使用專用封板膜，防止液體蒸發(fā)、交叉污染。
洗滌充分為實驗核心，殘留洗液易造成背景偏高、假陽性。
TMB 顯色液避光儲存，現(xiàn)用現(xiàn)加，嚴禁接觸氧化劑。
加終止液順序需與顯色加樣一致，避免局部色差、綠色殘留。
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