產(chǎn)品簡介:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿中的高密度脂蛋白 3(HDL3)含量。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于脂代謝、動脈粥樣硬化、心血管疾病及脂肪肝研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱:大鼠高密度脂蛋白3(HDL3)elisa試劑盒
英文名稱:HDL3 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)品貨號:CS-5896E
檢測原理:

大鼠高密度脂蛋白 3 (HDL3) ELISA 試劑盒的原理是?雙抗體夾心法?,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標(biāo)記的檢測抗體進(jìn)行識別,最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。
?固相化?:微孔板預(yù)先包被抗大鼠 HDL3 抗體。
?結(jié)合?:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,HDL3 被固相抗體捕獲。
?檢測?:加入生物su化的抗大鼠 HDL3 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。
?顯色?:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
?測定?:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?:

?試劑準(zhǔn)備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復(fù)5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍(lán)變黃)。
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內(nèi)完成。
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關(guān)鍵實操技巧:

1.加樣技巧
一次性換新槍頭,垂直貼孔壁低位加液;避免氣泡、飛濺交叉污染;整板加樣速度均勻統(tǒng)一。
2.溫育控溫
須37℃恒溫、封板膜嚴(yán)實防蒸發(fā)冷凝;時間嚴(yán)格卡死,過長背景高、過短信號低。
3.洗板核心
每孔注滿不溢出,浸泡≥30 s;拍干用無塵吸水紙,杜絕殘留;洗板不足直接高背景、假陽性。
4.樣本規(guī)范
杜溶血、脂濁、污染樣本;禁止反復(fù)凍融;嚴(yán)禁含 NaN?抑制 HRP 活性;濃度超標(biāo)只用試劑盒配套稀釋液。
5.顯色與讀數(shù)
全避光;整板顯色時長一致;加終止液立刻讀數(shù),放置越久數(shù)值漂移越大。
6.基礎(chǔ)質(zhì)控
樣本、標(biāo)準(zhǔn)均做復(fù)孔;室溫潔凈避光操作;試劑分裝取用,減少反復(fù)開蓋失效。