產(chǎn)品及特點(diǎn)：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，使每個(gè)循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測(cè)探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
幼蟲芽孢桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Paenibacillus larvae | EY00P9212 |
運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為12個(gè)月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供無(wú)傳染性的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品，設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）。可以用10μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝，該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板，省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管，其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照（用水做模板），6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照（用第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
廣藿香酮(標(biāo)準(zhǔn)品)（標(biāo)準(zhǔn)品）Human LPP ELISA Kit
(標(biāo)準(zhǔn)品)驅(qū)蟲斑鳩菊（標(biāo)準(zhǔn)品）Human LPIN2 ELISA Kit
(標(biāo)準(zhǔn)品）Human LPPR2 ELISA Kit
去甲斑蝥酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Human LPXN ELISA Kit
去甲斑蝥酸鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）Human LRAT ELISA Kit
去甲堿鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Human LPIN2 ELISA Kit
旱蓮苷A去甲氧基姜黃素Human LRCH1 ELISA Kit
去甲氧基姜黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human LPPR2 ELISA Kit
去甲氧基麻醉椒素Human LPP ELISA Kit
(標(biāo)準(zhǔn)品)去甲異波爾定（標(biāo)準(zhǔn)品）Human LMNB2 ELISA Kit
冬蟲夏草去甲澤拉木（標(biāo)準(zhǔn)品）Human LPXN ELISA Kit
17-戊酸酯,戊酸去芹菜糖桔梗皂苷D（標(biāo)準(zhǔn)品）Human LMF2 ELISA Kit
17-戊酸酯,戊酸去芹糖桔梗皂苷D3Human LRAT ELISA Kit
戊酸(標(biāo)準(zhǔn)品)去氫厄弗酚Human LRCH1 ELISA Kit
,酸去氫二異(標(biāo)準(zhǔn)品)Human LIN7A ELISA Kit
幼蟲芽孢桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒突觸蛋白2(SYNPO2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)磷酸酶抑制劑復(fù)合物 II 10x 質(zhì)量規(guī)格：>95%,進(jìn)分
角膜蛋白(KERA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)過* 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%
正五聚蛋白3(PTX3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)1 M Tris-緩沖液，pH 9.5， 滅菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%
中間α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)10 x Tris-TAPS-EDTA Buffer 質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
中間α-球蛋白抑制因子H2(ITIH2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)6 x Glycerol Gel Loading Dye I (BPB) 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
中間α-球蛋白抑制因子H1(ITIH1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)腺苷脫氨酶(15U/mg) 質(zhì)量規(guī)格：提取含量5%以上
CD72分子(CD72)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)阿脲 質(zhì)量規(guī)格：＞98.0% (LC&T)，標(biāo)準(zhǔn)品
血漿過氧化物酶(GPX3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)丁二水(>98%,USP) 質(zhì)量規(guī)格：>98%
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