【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
中文名稱：5核苷酸酶(5-NT)檢測(cè)試劑盒
英文名稱：5 nucleotidase (5-NT) ELISA Kit
包裝規(guī)格：液體盒裝 96T/48T
保存條件：2-8℃（不使用時(shí)，部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下）。
有效期：6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸：低溫避光，請(qǐng)勿重壓，輕拿輕放（現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運(yùn)輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。）
可測(cè)種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床。
性能優(yōu)點(diǎn)：
1、準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
2、靈敏度：低檢測(cè)濃度小于1.0 IU/mL。
3、特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4、重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5、貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6、有效期：6個(gè)月
7、檢測(cè)范圍：6.25 IU/mL -200IU/mL
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注意事項(xiàng)：
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣。
4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6、底物請(qǐng)避光保存。
7、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9、本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10、如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。
Lactobacillus plantarum 植物乳桿(胚芽乳桿)Lactobacillus plantarum提供形式:凍干粉安全等級(jí):1模式株:no培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:：酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g， 0.2 g，鈉 5.0 g，檸檬酸三銨 2.0 g， 2.0 g，硫酸錳 0.05 g，吐溫80 1.0 g，蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:37℃，微好氧 純度：97%
Streptococcus agalactiae B組鏈球Streptococcus agalactiae提供形式:凍干粉安全等級(jí):1模式株:no培養(yǎng)基:哥倫比亞血平板生長(zhǎng)條件:37℃，需氧或兼性厭氧，24-48h生長(zhǎng)特性非溶血。 純度：97%
Escherichia coli EPEC 腸道致病性大腸埃希氏Escherichia coli EPEC提供形式:凍干粉安全等級(jí):2模式株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究，革蘭氏陰性桿。含束狀毛B基因(bfpB) 和蛋白分泌物調(diào)節(jié)基因(escV)。培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:37℃，好氧。存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：96%
Armillaria gallica 法國(guó)蜜環(huán)（斜面）Armillaria gallica提供形式:斜面培養(yǎng)物/凍干物安全等級(jí):1模式株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究；。食用，藥用。培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯提取液 1.0L，葡萄糖 20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O 1.5g，1 微量，瓊脂 15.0g，pH6.0。生長(zhǎng)條件:25-28℃，好氧存儲(chǔ)條件:2-8℃ 純度：96%
Penicillium expansum 擴(kuò)展青霉（斜面）Penicillium expansum分離基物:果提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式株:yes培養(yǎng)基:麥芽膏瓊脂：麥芽膏 20.0g，瓊脂 20.0g，自來 1.0L，自然pH。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:25℃，好氧存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：96%
Paecilomyces lilacinus 淡紫擬青霉（斜面）Paecilomyces lilacinus提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式株:no應(yīng)用領(lǐng)域:脂肪合成。培養(yǎng)基:綜合PDA：20%馬鈴薯汁1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g，硫胺素微量，瓊脂 15g，pH 自然，121℃，15min。生長(zhǎng)條件:28℃，好氧存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：99%
Staphylococcus saprophyticus subsp. saprophyticus 腐生葡萄球腐生亞種Staphylococcus saprophyticus subsp. saprophyticus提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:37℃，好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%
Fusarium moniliforme 串珠鐮刀（斜面）Fusarium moniliforme分離基物:野燕麥提供形式:斜面安全等級(jí):1模式株:no應(yīng)用領(lǐng)域:檢測(cè)抗真性能。培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g， 1.5g，葡萄糖 20g，1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:25℃，好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%
5核苷酸酶(5-NT)檢測(cè)試劑盒MRS 瓊脂（MRSA）小鼠垂體成骨Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6（抗原）
改良克氏雙糖鐵瓊脂小鼠腦膜腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮Caspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6（抗原）
Pfizer 腸球菌選擇性瓊脂小鼠腦脊神經(jīng)元腦動(dòng)脈血管平滑肌phospho-AMPK alpha 1(Thr172) peptaide 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗原
Todd-Hewitt 肉湯小鼠黑質(zhì)神經(jīng)元腦靜脈血管內(nèi)皮Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6（抗原）
牛心湯培養(yǎng)基小鼠紋狀體神經(jīng)元腦靜脈血管平滑肌Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6（抗原）
BBL瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)小鼠海馬趾神經(jīng)元腦膜AD7C-NTP/NTP/AF peptide 神經(jīng)絲蛋白蛋白多肽抗原（人）
BL瓊脂培養(yǎng)基小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元神經(jīng)元Caspase-10 半胱胺酸蛋白酶-10（抗原）
MFC培養(yǎng)基小鼠顆粒神經(jīng)膠質(zhì)Caspase-13 半胱胺酸蛋白酶蛋白-13（抗原）
操作步驟：
實(shí)驗(yàn)開始前，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?，試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加標(biāo)記抗體工作液100μl（取1μl標(biāo)記抗體加99μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同標(biāo)記抗體工作液）100μl，37℃，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
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