細(xì)胞名稱 肝癌細(xì)胞；HuH-7
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 據(jù)說產(chǎn)甲胎蛋白，*α抗體，血漿銅藍(lán)蛋白，纖維蛋白原，纖維粘連蛋白等。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況: PN5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
肝癌細(xì)胞；HuH-7 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63928 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將*成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% *和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除*細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用*細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除*細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
碳酐酶3檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 突變型Ca
NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(美侖)FGF Receptor 1 AntibodyN-羥基哌啶
帕米膦酸Phospho-FLT3 (Tyr591) (33G6) Rabbit mAb7-硝基四氫喹啉
α,α-二基-哌啶甲Phospho-Histone H3 (Ser10) (D2C8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjuga)2--6-甲基*
葡萄糖氧化酶Phospho-FGF Receptor (Tyr653/654) (55H2) Mouse mAbL-天*-叔丁基酯
*(蛋清)Phospho-FGF Receptor (Tyr653/654) (55H2) Mouse mAb基
HRP;辣根過氧化物酶LATS1 (C66B5) Rabbit mAb5-硝基-2-吡啶羧酸
透明質(zhì)酸酶LATS1 (C66B5) Rabbit mAb2,3,4,6-四酰氧基-alpha-D-吡喃糖溴化物
*(來源于牛肺,*抑制劑)Pan-Keratin (C11) Mouse mAb (Alexa Fluor® 555 Conjuga)2-氨基-5-硝基嘧啶
E-64,蛋白酶抑制劑Pyk2 (5E2) Mouse mAb溴吡啶-2-羧酸
阿齊沙坦酯Phospho-Ephrin B (Tyr324/329) Antibody5-溴-2-吡啶羧酸
α-*Rat (LTF-2) mAb IgG2b Isotype Control (APC Conjuga)羥甲基膦酸二酯
α-*Phospho-LKB1 (Ser428) (C67A3) Rabbit mAb2-基-5-溴甲基吡啶
酰*三鋰鹽DUSP10/MKP5 Antibody2-溴-9-芴酮
尿素酶,脲酶(巨豆)TRPV3 AntibodyN-叔丁氧羰基-2-甲基氨酸
蛋白酶VIIISLFN11 (D8W1B) Rabbit mAb甲基吡啶
*HGK Antibody(R)-Boc-氨基哌啶
*(標(biāo)準(zhǔn)品)AQP2 AntibodyL-2-哌啶酸
β-NADH;還原性輔酶I二鈉鹽Phospho-HSP90α (Thr5/7) Antibody3，5-吡唑二甲酸
蘇拉明鈉MSK1 (C27B2) Rabbit mAb四丁基溴化
彈性蛋白酶Phospho-Stat3 (Ser727) (D4X3C) Rabbit mAb芐基-1-哌碳酸酯
脂肪酶Phospho-Stat3 (Ser727) (D4X3C) Rabbit mAb5-吡啶-2-
木聚糖酶Phospho-CrkII (Tyr221) Antibody5-溴-2-吡啶甲
透明質(zhì)酸,玻尿酸(分子量80萬(wàn)-150萬(wàn))PD-1 (D7D5W) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjuga)氟吡啶-2-
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣酸（分子量3K）CrkII Antibody氨基-5-甲基吡唑
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣酸（分子量10K）RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb(2-甲基)三基溴化膦
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣酸（分子量90K）RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb芐基哌啶
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣酸（分子量4K）EA/UBXD8 (D8H6D) Rabbit mAb2-三氟甲酰
*Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb活性二氧化錳
*(標(biāo)準(zhǔn)品)Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb環(huán)氧溴烷
*Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2,二溴噻吩
*酶(牛肝臟)Ingrin β1 (D6S1W) Rabbit mAb3,二溴噻吩
*,*酸Ingrin β1 (D6S1W) Rabbit mAb2,5-二溴噻吩
*(標(biāo)準(zhǔn)品)PHF2 (D45A2) Rabbit mAb2-甲基-2-戊酸
NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰腺嘌呤二核苷酸水合物PHF2 (D45A2) Rabbit mAb甲基-羥甲基氧雜環(huán)丁烷
NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰腺嘌呤二核苷酸水合物Bcl-2 (D17C4) Rabbit mAb (Mouse Preferred)D(+)-10-樟腦磺酸
β-NADP;β-煙酰腺嘌呤二核苷酸酸;氧化型輔酶 IIBcl-2 (D17C4) Rabbit mAb (Mouse Preferred)溴嘧啶
肝癌細(xì)胞；HuH-7表告依春1072-93-1中文別名：(R)-5-基-2-惡唑啉硫
英文名：Epigoitrin
CAS登錄號(hào)：1072-93-1
分子式：C5H7NOS
分子量：129.18
分子結(jié)構(gòu)：
外觀：白色針晶()
規(guī)格：20mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源：*（I. indigotica Fort.）的根
熔點(diǎn)：54～56℃
旋光度：+16.0°(c O．53，), ,+16.0°（c0.49,）
藥理藥效：主要用于抗病，治感冒。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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