產(chǎn)品及特點(diǎn)：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，使每個(gè)循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測(cè)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
極小棒桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Corynebacterium minutissimum | EY00P8848 |
運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為12個(gè)月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供無(wú)傳染性的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品，設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?0μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝，該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板，省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管，其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照（用水做模板），6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照（用第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
*MEM培養(yǎng)基/伊格爾培養(yǎng)基/伊格爾限必需培養(yǎng)基/MEM/SMEM 2'-Deoxyguanosine 5'-triphosphate trisodium salt
3-氯-4-吡啶甲酸乙酯DMEM培養(yǎng)基/DME培養(yǎng)基/DMEM 2'-Deoxycytidine 5'-triphosphate disodium salt
2-硝基間苯二甲酸M9肉湯/M9 Broth 2'-deoxythymidine-5'-triphosphate (dTTP),3sodium salt, dihydrate
3-氨基-4-噠羧酸M9CA肉湯/M9CA Broth 2'-Deoxyuridine
2-氯-5-溴-3-三氟甲基吡啶M63肉湯/M63 Broth Thymidine
3-氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯F12培養(yǎng)基/F-12營(yíng)養(yǎng)混合物/Hamˊs F12/F-12 Nutrient Mixture 2'-Deoxyguanosine monohydrate
5-氨基-3-氟苯DMEM/F12培養(yǎng)基/F-12（DMEM） 2'-Deoxycytidine;2'-dC
5-溴吡-2-羧酸甲酯199培養(yǎng)基/M199培養(yǎng)基/M199 Medium 2'-Deoxycytidine;2'-dC
5-溴吡-2-羧酸甲酯1640培養(yǎng)基/1640 Medium/RPMI 1640 2'-Deoxyadenosine monohydrate
*Hanks’平衡鹽/淋巴細(xì)胞洗滌液/Hank′s液/Hanks’ Balanced Salt solution DNA, Fishsperm
2--3-氨基吡啶IMDM培養(yǎng)基/IMDM DNA from salmon sperm
*一水合物高氏合成一號(hào)瓊脂培養(yǎng)基/GAUZEˊs Medium 5-Fluoro-2'-deoxycytidine
5-甲氧基*XM-G瓊脂培養(yǎng)基/XM-G Agar 5-Fluoro-2'--deoxyuridine
戊酸酐半固體瓊脂發(fā)酵管 Guanosine
4-溴吡啶-2-氨酸叔丁酯衛(wèi)矛半固體發(fā)酵管 Guanosine
極小棒桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒β-1,4-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1(β4GALT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)* 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,分子生物學(xué)級(jí)6次/盒
Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)*(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,分子生物學(xué)級(jí)1ml（500X）
黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鹽酸洛貝林 質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)6次/盒
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGFA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)氯尼達(dá)明 質(zhì)量規(guī)格：BR,100 um500 ml
含Rho關(guān)聯(lián)卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)氯尼達(dá)明 質(zhì)量規(guī)格：BR500 ml
AMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)氯尼達(dá)明 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR6次/盒
硝基*(NT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)氯尼達(dá)明 質(zhì)量規(guī)格：BR1ml（500X）
*過(guò)氧化酶1(GPX1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)洛匹那韋 質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物3×1ml
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