貓?jiān)t原代細(xì)胞
商品屬性：
規(guī)格 | 5×105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號(hào) | EY-XY4052 |
種屬來(lái)源 | 貓 | 組織來(lái)源 | 外周血 |
生長(zhǎng)特性 | 不可凍融，每天需輕輕顛倒，將紅細(xì)胞輕輕搖起 | 形態(tài)特征 |
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形態(tài)：
培養(yǎng)基：貓紅細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代特征：可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)
細(xì)胞基本屬性：
種屬來(lái)源：貓
組織來(lái)源：外周血外周血
生長(zhǎng)特性：不可凍融，每天需輕輕顛倒，將紅細(xì)胞輕輕搖起
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：0.25%胰蛋bai酶
產(chǎn)品貨期：現(xiàn)貨，1周左右
運(yùn)輸方式：T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應(yīng)限制：僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：:紅細(xì)胞(Erythrocytes，RBC)也稱(chēng)紅血球，是血液中數(shù)量多的一種血細(xì)胞，是脊椎動(dòng)物體內(nèi)通過(guò)血液運(yùn)送氧氣的主要的媒介，同時(shí)還存在免疫功能。紅細(xì)胞可以運(yùn)輸氧氣，也可以運(yùn)輸二氧化碳。運(yùn)輸二氧化碳時(shí)血液呈暗紫色，運(yùn)輸氧氣時(shí)則呈鮮紅色。紅細(xì)胞會(huì)生成于骨髓之內(nèi)。紅細(xì)胞老化后，易導(dǎo)致血管堵塞，所以會(huì)自動(dòng)返回骨髓深處，由白細(xì)胞負(fù)責(zé)銷(xiāo)毀;或是在經(jīng)過(guò)肝臟時(shí)，被巨噬細(xì)胞分解，成為膽汁。哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞呈兩面中央凹的圓餅狀，中央較薄。周緣較厚，故在血涂片標(biāo)本上中央染色較淺、周?chē)^深。新鮮單個(gè)紅細(xì)胞為黃綠色，大量紅細(xì)胞使血液呈深紅色。成熟的紅細(xì)胞（哺乳動(dòng)物）沒(méi)有細(xì)胞核和線粒體，富含血紅蛋白。依靠葡萄糖合成能量，平均直徑為9um。
原代細(xì)胞培養(yǎng)的主要步驟包括：
?一、剝離組織，去除外膜、結(jié)締組織等?：將組織從動(dòng)物體中取出，并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進(jìn)行消化。消化時(shí)間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時(shí)間短，冷消化時(shí)間長(zhǎng)但條件更溫和。
?四、吹打分散后，過(guò)濾、計(jì)數(shù)?：將消化后的細(xì)胞吹打到一個(gè)離心管中，然后過(guò)濾、計(jì)數(shù)。
五、?按30萬(wàn)/毫升分瓶培養(yǎng)?：將計(jì)數(shù)后的細(xì)胞按30萬(wàn)/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)操作：
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)
傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法：
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4.待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
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