商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | KG-1急性髓系細胞白血病細胞細胞系 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E2068 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 懸浮細胞 | 細胞形態(tài) | 原粒細胞 |
商品詳情：
別稱 KG1
年齡（性別） 男；59歲
組織來源 骨髓
生長特性 懸浮細胞
細胞形態(tài) 原粒細胞
背景描述 KG-1細胞是由H·P·Koeffler和D·W·Golde建立，骨髓抽自一個59歲的患有紅白血病而后又發(fā)展成急性骨髓原性白血病的男性白人。KG1細胞在形態(tài)上類似急性髓原白血病，表現(xiàn)為明顯的多形性，骨髓母細胞和骨髓細胞占優(yōu)勢。KG1細胞少量是成熟的粒細胞，也有微量的巨噬細胞和嗜曙紅細胞。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 IMDM＋20% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:2-1:3
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~38 hours
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
抗原表達情況 HLA A30, A31, B35, Cw4
基因表達情況 HLA DR
保藏機構(gòu) ATCC; CCL-246 ATCC; CRL-8031 BCRC; 60158 BCRJ; 0132 DSMZ; ACC-14 ECACC; 86111306
細胞系培養(yǎng)步驟：
細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復(fù)蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復(fù)蘇?：
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細胞凍存?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學(xué)研究提供了大量的細胞樣本?。
?細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復(fù)蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復(fù)蘇?：
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞凍存?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學(xué)研究提供了大量的細胞樣本?
細胞接收后的處理：
1）KG-1急性髓系細胞白血病細胞細胞系收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
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