本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的丙酮酸激酶（PK）濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于糖酵解代謝、能量代謝及肝腎功能研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠丙酮酸激酶(PK)elisa試劑盒 | 英文名稱 | PK ELISA Kit |
貨號 | CS-1210E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
核心原理：
固相化：微孔板預(yù)先包被抗小鼠 PK 抗體。
結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，PK 被固相抗體捕獲。
檢測：加入化的抗小鼠 PK 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
樣本要求：
1. 樣本類型與處理
?血清?：使用無熱原/內(nèi)毒素試管采集，避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清，-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
?血漿?：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，離心后取上清。
?細(xì)胞上清?：1000×g離心10分鐘去除顆粒，-70℃保存。
?組織勻漿?：生理鹽水勻漿后離心取上清，-20℃保存。
2. 注意事項(xiàng)
樣本中禁止添加NaN3，以免抑制HRP活性。
細(xì)胞培養(yǎng)上清可能因細(xì)胞狀態(tài)等因素導(dǎo)致檢測波動，建議設(shè)復(fù)孔。
操作步驟：
1.試劑準(zhǔn)備
將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。
標(biāo)準(zhǔn)品按說明書進(jìn)行梯度稀釋，配制系列濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。
2.實(shí)驗(yàn)流程
加樣：設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔，空白孔僅加稀釋液，其余孔分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品，37℃孵育。
加酶標(biāo)抗體：除空白孔外，每孔加入酶標(biāo)抗體，輕輕混勻，37℃避光孵育。
洗滌：棄去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后甩干，重復(fù)洗滌 4-5 次，最后拍干殘留液體。
顯色：每孔加入 TMB 顯色液，37℃避光孵育，孔內(nèi)呈現(xiàn)藍(lán)色。
終止：每孔加入終止液，混勻后顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色。
檢測：在 450nm 波長下測定各孔 OD 值，15 分鐘內(nèi)完成讀數(shù)。
3.關(guān)鍵提示
實(shí)驗(yàn)全程嚴(yán)格控溫，孵育時使用封板膜避免蒸發(fā)。
洗滌需充分，否則易造成高背景、結(jié)果偏差。
顯色液需避光，終止順序與加樣順序保持一致，確保充分混勻。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)elisa試劑盒 | 水稻內(nèi)源基因PCR檢測試劑盒 |
大鼠骨硬化蛋白(SCT)elisa試劑盒 | 人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)elisa試劑盒 |
豬瘟病毒抗原(CSFV-Ag)elisa定性檢測試劑盒 |
小鼠丙酮酸激酶(PK)elisa試劑盒三七探針法PCR鑒定試劑盒 |
大鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒 | 漢扎洛瓦病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
小鼠Lactoferrinelisa試劑盒 | 安氏毛圓線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
大鼠5-羥甲基胞嘧啶(5hmC)elisa試劑盒 | 哈特帕克病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
大鼠抗SSA；Ro抗體(SSA)elisa試劑盒 | 新港沙門氏染料法熒光定量PCR試劑盒 |
植物氧鯊烯環(huán)化酶（OSC）elisa試劑盒 | 泰澤隱孢子蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)elisa試劑盒 | 小泰勒蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 |
豬β-防御素124（PBD-124）elisa試劑盒 | 人腺病毒D67型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠干燥綜合征抗原A1抗體（SSA1 Ab;TRIM21 Ab）elisa試劑盒 | 漏蘆探針法PCR鑒定試劑盒 |
斑馬魚轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)ELISA試劑盒 | 柯薩奇病毒A16型變種染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
點(diǎn)擊放大
