產(chǎn)品簡介：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的成纖維細胞生長因子 4（FGF4）蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于胚胎發(fā)育、細胞增殖、腫瘤發(fā)生及組織再生研究等領域。
產(chǎn)品名稱：小鼠成纖維細胞生長因子4(FGF4)elisa試劑盒
英文名稱：FGF4 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
產(chǎn)品貨號：CS-1188E
檢測原理：
小鼠成纖維細胞生長因子 4 (FGF4) elisa 試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過固相載體捕獲抗原，再用酶標記的檢測抗體進行識別，最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化：微孔板預先包被抗小鼠 FGF4 抗體。
結合：加入標準品或樣本，FGF4 被固相抗體捕獲。
檢測：加入生物su化的抗小鼠 FGF4 抗體和 HRP 標記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍色變?yōu)辄S色。
測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?：
1.平衡試劑：試劑盒室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按比例稀釋備用。
2.加樣：設空白孔、標準品孔、樣品孔，每孔加對應標準品 / 稀釋后樣本，封板溫育。
3.溫育反應：37℃孵育 30–60 min，完成抗原抗體結合。
4.洗板：棄液甩干，洗滌液注滿每孔，浸泡后拍干，重復洗板3–5 次。
5.加酶結合物：除空白孔外，每孔加入 HRP 標記抗體，封板 37℃再次溫育。
6.再次洗板：同上述洗板流程，洗凈未結合游離酶標物。
7.顯色：每孔先后加入 A、B 顯色液，避光 37℃顯色 10–15 min。
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操作步驟?：
?1、試劑與樣本準備?：
將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），按說明書稀釋洗滌緩沖液（通常1:19）。
?標準品?：用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。
?樣本?：血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高，可按說明書（如1:10）稀釋。
?2、加樣與孵育?：
每孔加入100μL標準品或樣本。
輕輕振蕩混勻，避免觸碰孔壁。
37℃孵育90分鐘（部分試劑盒可能為120分鐘，需以說明書為準）。
?3、洗滌?：
棄去孔內(nèi)液體，用洗滌緩沖液加滿每孔，靜置30秒后甩干，重復5-6次。
4?、加檢測抗體與孵育?：
每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測抗體。
37℃孵育60分鐘。
5?、再次洗滌?：
同步驟3，洗去未結合抗體。
6?、顯色?：
每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。
37℃避光孵育10-15分鐘。
?7、終止與測定?：
每孔加入50μL終止液，立即混勻（顏色由藍變黃）。
在加終止液后15分鐘內(nèi)，用酶標儀在450nm波長處測定各孔吸光度（OD值）。
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