本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的可溶性補體激活產(chǎn)物（SC5b9）濃度。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL，靈敏度達0.16 ng/mL，適用于補體系統(tǒng)激活監(jiān)測、炎癥反應(yīng)及自身免疫病研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠可溶性補體激活產(chǎn)物(SC5b9)elisa試劑盒 | 英文名稱 | SC5b9 ELISA Kit |
貨號 | CS-0928E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理：
固相化：微孔板預(yù)先包被抗小鼠SC5b9抗體。
結(jié)合：加入標準品或樣本，SC5b9被固相抗體特異性捕獲。
檢測：加入標記的抗小鼠SC5b9抗體和HRP標記的親和素，形成"抗體-抗原-酶標抗體"復(fù)合物。
顯色：加入TMB底物，被HRP催化后由藍色變?yōu)辄S色。
測定：用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值)，濃度與OD值成正比。
樣本要求：
1. 樣本類型與處理
?血清?：使用無熱原/內(nèi)毒素試管采集，避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清，-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
?血漿?：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，離心后取上清。
?細胞上清?：1000×g離心10分鐘去除顆粒，-70℃保存。
?組織勻漿?：生理鹽水勻漿后離心取上清，-20℃保存。
2. 注意事項
樣本中禁止添加NaN3，以免抑制HRP活性。
細胞培養(yǎng)上清可能因細胞狀態(tài)等因素導(dǎo)致檢測波動，建議設(shè)復(fù)孔。
操作步驟：
1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標準品。
2. 每孔加 100μL 標準 / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。
5. 450nm 快速測 OD 值，擬合曲線算濃度。
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