產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)小鼠組織勻漿、細(xì)胞提取物中的 1,4,5 - 三磷酸肌醇（IP3）含量。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、鈣信號(hào)調(diào)控、磷脂代謝及受體通路研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱：小鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa試劑盒
英文名稱：IP3 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
產(chǎn)品貨號(hào)：CS-1434E
檢測(cè)原理：
小鼠 1,4,5 - 三磷酸肌醇 (IP3) elisa 試劑盒的原理是競(jìng)爭(zhēng)法，通過(guò)固相載體包被抗原與樣本抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體，再用酶標(biāo)抗體識(shí)別，最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)。
固相化：微孔板預(yù)先包被 IP3 人工抗原。
結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，樣本 IP3 與固相 IP3 競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體。
檢測(cè)：加入酶標(biāo)特異性抗體，形成抗原抗體復(fù)合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測(cè)定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成反比。
實(shí)驗(yàn)步驟?：
?試劑準(zhǔn)備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，37℃孵育90分鐘。
?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復(fù)5次。
?加檢測(cè)抗體?：每孔加入100μL檢測(cè)抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。
?洗滌?：同步驟3。
?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。
?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍(lán)變黃）。
?檢測(cè)?：450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度(OD值)，15分鐘內(nèi)完成。
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操作步驟?：
1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 每孔加 100μL 標(biāo)準(zhǔn) / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。
5. 450nm 快速測(cè) OD 值，擬合曲線算濃度。
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